對(duì)于紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)，你了解多少？
紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的用途之一是物質(zhì)的鑒定，主要是用來(lái)測(cè)量待測(cè)的未知或者已知的物質(zhì)對(duì)可見(jiàn)光的吸光度，并且同時(shí)的進(jìn)行定量分析。用途之二是進(jìn)行待測(cè)物質(zhì)和標(biāo)準(zhǔn)物及標(biāo)準(zhǔn)圖譜對(duì)照的分析。用途之三是用來(lái)比較某種物質(zhì)比較大的吸收波長(zhǎng)吸收系數(shù)一致性。用途之四是進(jìn)行物質(zhì)的純度檢驗(yàn)。紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的用途之五是用來(lái)推測(cè)化合物的分子結(jié)構(gòu)以及其構(gòu)成等。用途之六是判定絡(luò)合物的組成測(cè)定。
A.紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的原理：
紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的工作原理：基于朗伯-比耳(Lambert-Beer)定律，即物質(zhì)在一定濃度下的吸光度與它的吸收介質(zhì)的厚度呈正比。
通常表述為：當(dāng)一束平行的單色光通過(guò)某一均勻的有色溶液時(shí)，溶液的吸光度與溶液的濃度和光程的乘積成正比，其數(shù)學(xué)表達(dá)式如下：
A=-lg（ It/I0 ）= - lgT= =εbC
式中，A 為吸光度；I0為入射的單色光強(qiáng)度；It為透射的單色光強(qiáng)度；T為物質(zhì)的透射率；ε為摩爾吸光系數(shù)（L·mol-1·cm-1）；b為被吸收層厚度（cm），即比色皿的光程；C為物質(zhì)的摩爾濃度（mol·L-1）；
B.紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)常見(jiàn)應(yīng)用：
紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)廣泛應(yīng)用于制藥、醫(yī)療衛(wèi)生、化工、能源、機(jī)械、冶金、環(huán)保、地質(zhì)、食品、生物、材料、農(nóng)業(yè)、林業(yè)、漁業(yè)等行業(yè)，在高等教育、計(jì)量科學(xué)和科研院所中的教學(xué)、科研領(lǐng)域，以及生產(chǎn)中的質(zhì)量控制，原材料和產(chǎn)品檢驗(yàn)等各方面發(fā)揮著重要作用，是理化實(shí)驗(yàn)室常用的分析儀器。
C.紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的光譜范圍：
常見(jiàn)的紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的波長(zhǎng)范圍為190-1100 nm。通常所指的可見(jiàn)光譜范圍為400-700 nm，是指被人眼能感知到的光譜范圍，200-400 nm為紫外光譜范圍。一般，在可見(jiàn)區(qū)測(cè)試的樣品必須是有色物質(zhì)。
D.紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)具體應(yīng)用如下：
1）核酸、蛋白濃度測(cè)量以及細(xì)菌生長(zhǎng)濃度測(cè)量。
2）食品、水質(zhì)、合金等樣品中的金屬元素（如鐵、錳、鎘、銅、鋁等）及非金屬元素（如硅、磷/磷酸鹽、硝酸鹽、硫酸鹽、氟化物等）分析。
3）與其他分析儀器聯(lián)用，并進(jìn)行定性分析，如有機(jī)化合物的分析、藥物分析。常見(jiàn)的 分析手段如：與標(biāo)準(zhǔn)物及標(biāo)準(zhǔn)圖譜對(duì)照；比較大吸收波長(zhǎng)吸收系數(shù)的一致性。
E.紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的使用方法：
1）溶液裝入比色皿約2/3高度處為宜；盡量避免氣泡的產(chǎn)生；若溶液殘留在比色皿外壁，應(yīng)及時(shí)擦拭干凈（先用濾紙吸干，然后用擦鏡紙輕拭光面）；對(duì)于易揮發(fā)的樣品，建議使用比色皿蓋；盡量避免沾污樣品架，否則應(yīng)及時(shí)擦去樣品架上殘留液體。
2）比色皿使用完畢應(yīng)及時(shí)清洗，并用適當(dāng)?shù)姆椒ㄇ逑矗羟逑床划?dāng)或沒(méi)有清洗干凈，也會(huì)影響測(cè)量結(jié)果的準(zhǔn)確度和穩(wěn)定性。
3）測(cè)試過(guò)程中，若某一光源不用，可選擇將其關(guān)閉，以延長(zhǎng)燈的使用壽命；儀器不用時(shí)，請(qǐng)及時(shí)關(guān)機(jī)、并拔掉電源插頭，以防止雷雨天氣可能造成的損壞。
4）請(qǐng)勿擅自拆卸儀器外殼和內(nèi)部零部件，尤其是光路結(jié)構(gòu)部分，切勿隨意松動(dòng)其緊固螺釘和螺母；請(qǐng)勿隨意觸碰各光學(xué)表面（包括光源），以免影響儀器的正常工作、甚至造成人為損壞。
5）保持儀器表面和工作環(huán)境的清潔；杜絕使用汽油、乙mi等有機(jī)溶液擦拭儀器外殼；儀器不用時(shí)可用防塵罩進(jìn)行防護(hù)。
6）紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)應(yīng)避免長(zhǎng)期不用，建議定期開(kāi)機(jī)確保其能正常運(yùn)轉(zhuǎn)；溫、濕度較高的地區(qū)應(yīng)特別注意防潮。
